第200章 35%（感谢牛津面的盟主！） (第1/3页)

    第200章 35%（感谢牛津面的盟主！）

    学校的实验室条件没那么好。

    空调老化，地方不大，房间里人也有点多。

    条件算是艰苦吧，大家却一点不觉得累，一个个热血沸腾的，就想着快点把这个项目做出来。

    陈浩上次这么有动力的时候还是在大二夏天，跟老江去参加网吧举办的cs1.6网吧赛。

    时过境迁。

    曾经的m4网瘾少年，现在已经变成使用移液枪的高手了。

    蔡卓群将无酶水吸出，打入离心管底部，反复吹打。

    王晓晴观察片刻后说：“测一下吧。”

    蔡卓群点点头，拔下枪头，拿着样本走到nanodrop分光光度计前。

    用移液枪吸取了1微升样本，滴在检测基座上，放下检测臂，在连接的旧台式电脑上点击了测量。

    屏幕上很快跳出了数据。

    陆晓林停下了手里的活，转头问道：“多少？”

    蔡卓群：“浓度12ng/ul，a260/280比值是1.32，a260/230比值是0.7。”

    王晓晴盯着屏幕看了一会儿，有点无奈：“这已经是第四批废样了……”

    项目的难度远远超出除江河外所有人的预期。

    虽然之前江河用加入dmso的方法，解决了pcr扩增阶段引物二聚体的问题。

    但解决了一个问题，接下来还会出现更多的问题……

    现在的瓶颈，卡在了提取上。

    mirna在血液中的含量极低，且非常容易被血液中的rna酶降解。

    纯度不够。

    a260/280的比值正常应该在1.8到2.0之间，低于1.8就意味着样本中存在大量的蛋白质污染。

    而a260/230比值只有0.7，更是说明里面混了大量的酚类物质或者盐离子。

    用这种样本去做下一步的逆转录，杂质会让逆转录酶失活，后面的pcr扩增根本跑不出真实数据。

    蔡卓群试图寻找原因：“王教授，是不是氯仿的用量不够？我们在取上清液的时候，可能还是带入了一些中间层的蛋白质。”

    王晓晴摇摇头：“上一批我们已经把氯仿的比例提高了百分之二十，离心时间也延长了五分钟，纯度是稍微好了一点，但是浓度直接掉到了5ng/ul以下。”

    陆晓林在一旁分析：“血清里全是蛋白，游离的核酸少，trizol提取法，用在血清上，天生就有缺陷。”

    实验室众人，陷入沉默。

    其实在后世，有专门针对血清的柱提法商业试剂盒，傻瓜式操作，半个小时就能得到高纯度的mirna。

    但在08年，专门针对液体活检的试剂盒在国内根本买不到，就算买到了技术也还远未成熟，所以只能用最基础的化学试剂，手工一步步去抠。

    蔡卓群问：“王教授，有什么办法没？”

    王晓晴：“别问我，江河呢？江河去哪儿了？”

    陈浩举手：“老江说有点事来着，马上回来。”

    王晓晴：“那大家先停一下吧，休息十分钟。”

    晓晴教授现在也是学聪明了。

    自己苦哈哈研究半天，不如江河回来一句话直接解决。

    与其浪费脑细胞，还不如休息休息，保存体力……

    众人出去休息时。

    易向晚和顾亦舟去给大家买水。

    在路上，易向晚罕见地没有开玩笑，略显忧愁的说道：

    “师兄，你说咱们这项目，到底能成吗？”

    顾亦舟看了他一眼：“怎么了？不想干了？”

    “哎呀，那肯定不是啊，只是……我在想一件事嗷，退一万步讲，就算我们今天把提取纯度的问题解决了，就算接下来的逆转录、pcr体系全部都解决了，然后呢？”

    顾亦舟皱着眉头。

    易向晚接着说：“我们该如何验证呢？既然是胰腺癌早筛，那到了最后，验证模型是否有效的话，我们需要真正的患者样本吧？”

    “而且，我们需要的是【看起来完全